Ο Άγιος Ισίδωρος, καταγόμενος από την Αλεξάνδρεια, προερχόταν από ευγενή οικογένεια και ήταν συγγενής των αρχιεπισκόπων Θεοφίλου και Κυρίλλου. Άφησε τη κοσμική ζωή και αποσύρθηκε στο Όρος Πιλουσιώτ, όπου αποδέχθηκε τη μοναχική ζωή και έγινε ηγούμενος. Η αυστηρή ζωή του και η πνευματική του σοφία προσέφεραν πολλούς μαθητές, και ήταν σεβαστός όχι μόνο μεταξύ του κλήρου αλλά και μεταξύ των αυτοκρατόρων.
Ο εκκλησιαστικός ιστορικός Ευάγριος σημειώνει ότι ο Ισίδωρος ήταν σε μεγάλη τιμή κατά την εποχή του Θεοδοσίου Β', και η ζωή του ήταν παράδειγμα μοναστικής αρετής. Ο Νικηφόρος Κάλλιστος μαρτυρεί για τα έργα του και την πληθώρα επιστολών στις οποίες εξηγούσε τη Θεία Γραφή και καθοδηγούσε τους ανθρώπους.
Έγινε υπερασπιστής του Αγίου Ιωάννη Χρυσοστόμου, γράφοντας στον Θεόφιλο και τον αυτοκράτορα Αρκάδιο, καλώντας τους να εγκαταλείψουν τα κακά έργα. Μετά τον θάνατο του Χρυσοστόμου, ο Ισίδωρος έπεισε τον Άγιο Κύριλλο να συμπεριλάβει το όνομα του Ιωάννη στα εκκλησιαστικά διπυθίδια ως μεγάλο ομολογητή.
Ο Άγιος Ισίδωρος έγραψε επίσης στον αυτοκράτορα Θεοδόσιο, ενθαρρύνοντάς τον να φροντίσει για την ειρήνη της εκκλησίας και να συγκαλέσει την Τρίτη Οικουμενική Σύνοδο στην Έφεσο κατά των αιρετικών. Στις επιστολές του, τόνισε τη σημασία της αρετής, της αγνότητας και της ταπεινοφροσύνης, καλώντας σε πνευματική ζωή και καλά έργα.
Άφησε πίσω του πολλές διδασκαλίες για τις αρετές και, φτάνοντας σε βαθιά γεράματα, αναπαύθηκε εν ειρήνη, ευαρεστώντας τον Θεό.
