Преподобни Стефан био је савременик преподобног Сергија Радонежског, рођен и одрастао у Кијеву. Након што је примио монашке завете у Кијевско-печерској лаври, живео је живот у строгој уздржаности и молитви. У условима прогона православних, преселио се у православну Москву, где је основао манастир у шумовитом подручју Махриштје.
По благослову светитеља Алексеја, преподобни Стефан постао је игуман новоосноване обитељи, где се посветио молитви и раду, упућујући браћу на пут спасења. био је познат по својој скромности и врлинском животу, привлачећи многе ревнитеље побожности.
Преподобни Стефан имао је блиске везе са преподобним Сергијем, који је, с друге стране, тражио осаму. Стефан је посветио свој живот служењу Богу и заједници, а такође је прихватио ученика Григорија, који је постао презвитер у његовом манастиру.
Године 1406, осећајући приближавање своје смрти, сазвао је браћу и поучио их о страху Божијем и љубави. Преподобни Стефан преминуо је 14. јула, а његови мошти су сахрањени у манастиру Живоначалној Тројице.
После његове смрти почела су чуда повезана са његовим именом. Године 1550, приликом изградње нове цркве, мошти преподобног су пронађене нетрулежне, што је постало знак његове светости.
