Ікона Богородиці знаходиться в іконостасі часовні Акафістної, прибудованій зліва від головного храму. Зроблена ця ікона з воску і мастики і, за легендою, належить руці самого апостола Луки. Вона була пронесена хрестним ходом разом з іншими святинями Патріархом Сергієм навколо стін Константинополя під час його облоги в 624 році, коли імператор Іраклій відсутній був у військовому поході проти персів. Ворожий флот був зруйнований морським штормом, і місто було врятовано заступництвом Богородиці; віряни виконали нічне бдіння, під час якого патріарх співав Акафіст. Імператор Олексій III Великий Комнін подарував ікону засновнику монастиря Діонісіат під час їх зустрічі в Трапезунді в 1374 році. Ікону назвали мироточивою, оскільки іноді виділяє миро, сліди якого помітні на її поверхні.
Під час піратського набігу 1592 року ікону Богородиці разом з іншими святинями було викрадено з монастиря. Однак на морі піднявся небачений шторм, і тут же Богородиця з'явилася лідеру піратів і віщувала, що ікону треба негайно повернути в монастир. Коли він відкрив скриню, в якій знаходилася ікона, то виявив, що вона була повністю покрита миром. Перелякані пірати повернули образ до Діонісіату, а двоє з них залишилися при монастирі та взяли монашу постриг.
У 1758 році викладач Афонської Академії архимандрит Євген Вулгаріс був вилікований цією іконою від страшного захворювання. В 1767 році образ був викрадений іноземцями вдруге, але християни змогли повернути його та перевезти на острів Скопелос. Спочатку мешканці острова не захотіли повертати ікону представникам монастиря, які прийшли забрати її. Проте їх змусили це зробити, оскільки на острові почалася епідемія.
Під час великих свят ікону несуть хрестним ходом з часовні Акафістної в головний храм монастиря під дзвони. Під час носіння ікони священики співають "Достойно є". У головному храмі ікону розміщують на особливому троні, де вона залишається для поклоніння протягом суботи 5-го тижня Великого Посту, на який припадає свято Богородиці, а також під час світлої Седмиці, різдвяних Святок та в день святкування самого монастиря.
У часовні Богородиці Акафістної кожен день відбувається божественна літургія та виконується прохання канон.
Пісня Пресвятої Богородиці - це відомий усім гімн з головною темою Божого вочеловічення через Божу Матір. Цей гімн є типом церковної поезії, що отримав особливе поширення у V-VI століттях. Автор цього гімну залишається невідомим.
За своєю структурою гімн складається з 24 строф, за числом букв у грецькому алфавіті; кожна строфа починається з відповідної літери від Альфи до Омеги. Інші строфи починаються зі слова "Радуйся".
Цей гімн є одним з найкращих прикладів Візантійської поезії. Він надихнув не лише на написання нових гімнів, але також на створення ікон та фресок, які запечатліли 24 строфи в малюнках. Цей гімн завжди допомагає страждаючим - не лише у повсякденному житті, але і в годину перед смертю, як це видно з життя різних святих.
На жаль, ікона Богородиці Акафістної пошкоджена в багатьох місцях через виділяне миро; фігури Богородиці та Христа майже нерозрізнимі.
Богородиця монастиря Діонісіат зображена у ніжному обіймі з младенцем Христом і відноситься до типу іконографії Богородиці Умилення, відомого ще з середньовізантійського періоду.
.jpg)
Ікона з обох сторін покрита окладом, створеним у 1786 році за витратами Митрополита Белграда Єремії. На лицьовій стороні нижньої частини срібного з позолотою оклада читається напис: "Молитва раба Божого Єремії архієрея, 1786 травень 20". На зворотній стороні срібного оклада зображена передача ікони імператором Трапезунди Олексієм III Великим Комніним засновнику монастиря Діонісіат. Ця сцена супроводжується написом, що описує історію ікони. Над головою імператора читається: "Олексій Цар Великий Комнін", над засновником монастиря: "Святий Діонісій з Афону".
У XVIII столітті ікона монастиря Діонісіат була інкрустована в іншу ікону, на якій зображені 24 строфи Акафіста. Ця частина також прикрашена окладом зі срібла та золота, створеним монахом Йосифом Неоскітіотісом в 1930 році, коли ігуменом був архімандрит Марк.
Практика інкрустації однієї ікони в іншу добре відома, починаючи з періоду Палеологів (XIII століття) і обумовлена бажанням сакцентувати увагу на особливо шанованій іконі. У випадку монастиря Діонісіат ця інкрустація є наслідком бажання супроводити ікону Богородиці зображенням 24 строф Акафіста. Аналогічним прикладом є ікона з іконостасу храму Успіння Богородиці на острові Мілос, де зберігається така "інкрустована" ікона Богородиці Умилення. На цій іконі на рамі XVII століття, так само як і у випадку ікони монастиря Діонісіат, були розміщені строфи Акафіста, пророки зі свитками та символи, які мають стосунок до Богородиці.
