Η Αγία Ματρώνα γεννήθηκε στην Πέργη της Παμφυλίας τον 5ο αιώνα. Μετά τον γάμο της με τον Δομέτιο και τη γέννηση της κόρης της Θεοδωτίας, η οικογένεια μετακόμισε στην Κωνσταντινούπολη. Η Ματρώνα, που αγαπούσε να επισκέπτεται τον ναό, άρχισε να μιμείται τους αγίους γέροντες Ευγένιο και Σουσάννα, επιδιώκοντας την αποκήρυξη του κόσμου. Μετά από ένα όραμα στο οποίο της δόθηκε εντολή να εισέλθει σε ανδρικό μοναστήρι, έκοψε τα μαλλιά της, ντύθηκε με ανδρικά ρούχα και μπήκε στο μοναστήρι του Αγίου Βασσιανού, προσποιούμενη ότι ήταν ο ευνούχος Βαβίλας.
Στο μοναστήρι, η Ματρώνα έδειξε ταπεινότητα και επιμέλεια, αλλά σύντομα ο ηγούμενος ανακάλυψε ότι ήταν γυναίκα. Αποκάλυψε τις προθέσεις της και ευλογήθηκε να ζήσει σε γυναικείο μοναστήρι στην Έμεσα. Εκεί, έγινε η ηγουμένη και έγινε γνωστή για τις αρετές της και το δώρο της θεραπείας.
Μαθαίνοντας για τους άθλους της, ο σύζυγός της ήρθε στο μοναστήρι, και η Ματρώνα έφυγε κρυφά για την Ιερουσαλήμ, στη συνέχεια για τη Βηρυτό, όπου ίδρυσε ένα νέο μοναστήρι. Αργότερα, μαθαίνοντας για τον θάνατο του συζύγου της, επέστρεψε στην Κωνσταντινούπολη και ίδρυσε εκεί ένα γυναικείο μοναστήρι, γνωστό για τον αυστηρό κανόνα του και τη θεάρεστη ζωή των αδελφών.
Στην προχωρημένη ηλικία της, η Ματρώνα αξιώθηκε να δει τον παράδεισο και παρέδωσε την ψυχή της στον Κύριο σε ηλικία εκατό ετών, γύρω στο 492.
